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人窖蛋白(Cav-1)免疫組化試劑盒?實驗步驟

點擊次數:69 發布時間:2021-12-09
 

人窖蛋白(Cav-1)免疫組化試劑盒實驗步驟(建議方案):


1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr;


2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;


3.水化: 切片經下行酒精水化,無水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%

乙醇2 min;75%乙醇2min,自來水沖洗,ddH2O 洗2×2min;


4.抗原修復: 根據抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第5 步封閉。


5.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育30 min;


6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過夜;


7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);


8.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育10 min;


9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30 min;


10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);


11.封閉: 滴加試劑Tween 20,37℃濕盒孵育封閉20 min;


12.加HRP-SA: 滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20 nM),37℃濕盒中孵育30 min;


13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);


14.顯色:應用DAB 溶液(試劑F)顯色;


15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;


16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;


17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。

(2NP-AMOZ)呋喃它酮代謝物單克隆抗體

(2NP-SEM)呋喃西林酮代謝物單克隆抗體

(2NP-AHD)呋喃妥因代謝物單克隆抗體

孔雀石綠單克隆抗體

氯霉素單克隆抗體

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磺胺嘧啶單克隆抗體

磺胺二甲基嘧啶單克隆抗體

磺胺二甲氧嘧啶單克隆抗體

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